Tam hoàng thang là phương thuốc kinh điển, nghiên cứu định lượng hoạt chất chính giúp phát triển bài thuốc. khảo sát sơ bộ điều kiện chiết; tiến hành xây dựng và thẩm định quy trình định lượng các hoạt chất chính trong cao bài thuốc. nghiên cứu đối tượng nghiên cứu là cao bài thuốc; sử dụng phương pháp sắc ký lỏng pha đảo ghép nối đầu dò dãy diod quang. Kết quả  điều kiện sắc ký: pha tĩnh là cột Zorbax Eclipse XDB-C18, pha động gồm ACN – dung dịch đệm (chứa 3,4 g kali dihydrophosphat và 1,7g natri laurylsulfat trong 1000 mL hỗn hợp dung môi gồm nước – acetoniltrile (1:1)) tỉ lệ 48:52;bước sóng phân tích 346 nm, tốc độ dòng: 0,7 mL/phút; nhiệt độ cột 40oC; thể tích tiêm mẫu: 20µL. Quy trình được thẩm định về tính tương thích hệ thống, tính đặc hiệu, tính tuyến tính (palmatin) (2,34 – 75 ppm): y = 19028x + 60496 với R2 = 0,9999; berberin (9,38 – 300 ppm): y = 96282x +137909 với R2 = 0,9999), độ chính xác (RSD trong ngày và khác ngày của palmatin và berberintrong khoảng 0,63 – 1,37); độ đúng (tỷ lệ thu hồi trung bình trong khoảng 95,52 – 100,74); LOD và LOQ của palmatin và berberin lần lượt là 0,28 ppm, 0,84 ppm và 1,51 ppm, 4,56 ppm; đạt yêu cầu quy định theo hướng dẫn của AOAC.

Phương pháp đã xây dựng và thẩm định có thể ứng  dụng để định lượng đồng thời hàm lượng palmatin và berberin có trong các chế phẩm chứa cao bài thuốc Tam hoàng thang.